二氧化碳培養(yǎng)箱用水指南

二氧化碳培養(yǎng)箱用水指南

二氧化碳培養(yǎng)箱，通過模擬類似細胞/組織在生物體內(nèi)的生長環(huán)境，來對細胞/組織進行體外培養(yǎng)，廣泛應(yīng)用于醫(yī)學、免疫學、遺傳學、微生物、農(nóng)業(yè)科學、藥物學的研究和生產(chǎn)。
根據(jù)工作原理二氧化碳培養(yǎng)箱可分為水套式和氣套式兩種。水套式二氧化碳培養(yǎng)箱需要加水，通過水的熱量傳遞保持溫度的恒定和維持足夠的濕度水平。一般培養(yǎng)箱會在加熱的控制面板上安裝一個蓄水池，需要定期加入超純水，維持箱內(nèi)的濕度，避免培養(yǎng)液蒸發(fā)。
培養(yǎng)箱為什么需要加超純水呢？
1、降低水中離子的影響
在細胞培養(yǎng)中，一些重金屬離子的含量要求控制在細胞所需的生理范圍內(nèi)，如：銅離子濃度過低，會影響相關(guān)酶的活性及相應(yīng)的生理代謝途徑，進而影響細胞的正常生長；銅離子濃度過高時，促進自由基形成，同時能氧化蛋白、脂類和 DNA，造成細胞膜電位的下降進而引起細胞的死亡；鈣、鎂等金屬離子會降低胰酶活力，達不到消化的效果。
通常，電阻率儀能檢測到的18.2 MΩ·cm的超純水中離子雜質(zhì)的總含量小于1ppb(250C)，已有效去除了水中的金屬離子。
牛血清和培養(yǎng)基中的離子濃度已滿足細胞生長的需要，在細胞培養(yǎng)試劑的配制和細胞培養(yǎng)箱用水，為避免干擾，應(yīng)該選用超純水，尤其是在配置消化液時需要使用低鈣鎂型的超純水。使用超純水，不僅可有效防止礦物質(zhì)儲積在水箱內(nèi)產(chǎn)生腐蝕作用，也會降低水中的金屬元素對細胞生長的影響。
2、避免微生物的引入
細胞培養(yǎng)箱污染是導致細胞培養(yǎng)失敗的一個主要因素，會殃及整個實驗室的細胞培養(yǎng)實驗。二氧化碳培養(yǎng)箱中的主要污染源：細菌、真菌(霉菌和酵母菌)、病毒、支原體、非同種細胞等。另外，內(nèi)毒素污染也會給細胞培養(yǎng)實驗帶來諸多難以預料的不良后果，如，改變細胞形態(tài)，影響細胞附著力，活化細胞產(chǎn)生細胞因子等，極大程度影響后續(xù)實驗進程和結(jié)果的準確性。
通常細胞培養(yǎng)的內(nèi)毒素污染來自于血清、培養(yǎng)液及外加藥物配制用水等。為避免細胞培養(yǎng)受到內(nèi)毒素污染的影響，選擇無內(nèi)毒素的超純水進行細胞培養(yǎng)相關(guān)試劑的配制和細胞培養(yǎng)箱供水是很關(guān)鍵的一步。
通過實驗證明，可高效去除水中的熱原(內(nèi)毒素)、核酸酶、細菌等雜質(zhì)，是防止外源微生物污染箱內(nèi)環(huán)境的一個有效屏障。
3、減少有機物的影響
水中的有機雜質(zhì)通常是生物源、植物材料腐爛產(chǎn)生的腐殖酸，這些溶解在水中的有機物會促進微生物的繁殖，阻礙細胞的生長。細胞培養(yǎng)的有機物含量要求TOC<5ppb。